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卵泡液中顆粒細(xì)胞分離和細(xì)胞培養(yǎng)

更新時間:2025-06-17 10:07:50       點(diǎn)擊次數(shù):99

1. 收集臨床病人的卵泡液;

2. 用40um的細(xì)胞篩過濾卵泡液;

3. 1000rpm/10min,室溫離心,棄上清;

4. 1ml PBS重懸;

5. 將重懸液小心加入到2ml 50%的percoll液面上;

6. 2500rpm/25min,室溫離心;

7. 溶液分為三層:無色上清液、中間的白色膜狀細(xì)胞層、下層的紅細(xì)胞層;

8. 吸取中間漂浮的白色膜狀細(xì)胞層;

9. 用1ml PBS重懸白色膜狀細(xì)胞層,吹打混勻;

10. 1500rpm/10min,室溫離心,沉淀用DMEM/F12完全培養(yǎng)基重懸;

11. 將收集的顆粒細(xì)胞,用DMEM/F12完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。

12. 代表性結(jié)果。

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