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活性氧是細胞線粒體氧化呼吸中產(chǎn)生的自由基活性的物質(zhì),參與細胞多種生理和病理形成機制。檢測細胞ROS的含量,可以了解ROS在細胞一些生理和病理狀態(tài)中的變化,分析藥物效應(yīng)和相關(guān)機制。
細胞接種存活率只表示接種細胞后貼壁的細胞數(shù),但貼壁后的細胞不一定每個都能增殖和形成克隆。而形成克隆的細胞必為貼壁和有增殖活力的細胞??寺⌒纬陕史从臣毎后w依賴性和增殖能力兩個重要性狀。
細胞遷移是指細胞在接收到遷移信號或感受到某些物質(zhì)的梯度后而產(chǎn)生的移動。細胞遷移為細胞頭部偽足的延伸、新的黏附建立、細胞體尾部收縮在時空上的交替過程。細胞遷移是正常細胞的基本功能之一,是機體正常生長發(fā)育的生理過程,也是活細胞普遍存在的一種運動形式。胚胎發(fā)育、血管生成、傷口愈合、免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)、動脈粥樣硬化、癌癥轉(zhuǎn)移等過程中都涉及細胞遷移。檢測細胞遷移能力的實驗包括劃痕實驗和Transwell實驗。
細胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源及生物學意義區(qū)分為凋亡和壞死兩種不同類型。凋亡普遍存在于生命界,在生物個體和生存中起著非常重要的作用。它是細胞在一定生理條件下一系列順序發(fā)生事件的組合,是細胞遵循一定規(guī)律自己結(jié)束生命的自主控制過程。細胞凋亡 具有可鑒別的形態(tài)學和生物化學特征。
免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescence technique)又稱熒光抗體技術(shù),是標記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種。它是在免疫學、生物化學和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來的一項技術(shù)。很早以來就有一些學者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合,利用抗原抗體反應(yīng)進行組織或細胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。它是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標記上熒光基團,再用這種熒光抗體(或抗原)作為探針檢查細胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)。利用熒光顯微鏡可以看見熒光所在的細胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)和定位。
原核注射實驗是一種將外源DNA直接注入受精卵原核(通常為雄原核)中的轉(zhuǎn)基因技術(shù),用于制備轉(zhuǎn)基因動物模型。注射后,外源基因可隨機整合到宿主基因組中,并在后續(xù)發(fā)育中穩(wěn)定遺傳。該方法操作簡便、效率較高,是構(gòu)建轉(zhuǎn)基因小鼠等模式生物的常用手段,廣泛應(yīng)用于基因功能研究、疾病模型建立及藥物開發(fā)等領(lǐng)域。
囊胚注射實驗是一種將外源細胞(如胚胎干細胞或基因編輯后的細胞)注入早期胚胎(囊胚期)的技術(shù),用于制備嵌合體或轉(zhuǎn)基因動物模型。注射的細胞可參與胚胎發(fā)育,形成嵌合體個體,其中部分組織或器官由外源細胞構(gòu)成。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于基因功能研究、疾病模型建立及再生醫(yī)學領(lǐng)域,是研究細胞分化、發(fā)育生物學和基因編輯的重要工具。
胞質(zhì)注射實驗是一種將外源物質(zhì)(如mRNA、蛋白質(zhì)或其他分子)直接注入細胞質(zhì)中的顯微操作技術(shù),常用于早期胚胎或卵母細胞。與注入細胞核不同,胞質(zhì)注射主要用于實現(xiàn)瞬時表達或功能干預,避免對基因組造成yong久性改變。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于基因功能研究、胚胎發(fā)育機制探索以及輔助生殖等領(lǐng)域。
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